Са2+ - зависимая активность нейтральных протеаз в тканях крыс при гипотермии

Результаты исследования изменения активности Са2+ - зависимой нейтральной протеазы представлены в таблице 4. Максимальная активность ферментов кальпаиновой системы обнаруживается в сердце и составляет 52.4±2.7 мкМоль тирозина/мг белка (рис. 13).

Если принять контрольное значение активности кальпаинов в сердечной мышце за 100%, то в мозгу, печени и сыворотке крови она составляет 44, 62.5 и 20.6%, соответственно.

Рис. 13. Активность Са2+-зависимой нейтральной протеазы в сердечной мышце крыс при разных температурах тела. Здесь и далее: * - достоверность различий относительно контроля.

Таблица 4 Активность Са2+ -зависимой нейтральной протеазы в тканях и сыворотке крови (мкмоль тирозина/мг белка) крыс (n=6)

Ткани	Контроль 37°C	Гипотермия 30-33°С	Гипотермия 18-20°С	Пролонгирование гип.20°С 2 часа	Гипертермия 42°С
мозг	23.3±0.6	19.8±1.3 Р1<0.025	7.2±0.9 Р1<0.001 Р2<0.001	25.3±0.3 Р1<0.01 Р2<0.001	19.0±0.9 Р1<0.01
сердце	52.4±2.7	40.3±4.0 Р1<0.05	21.6±1.8 Р1<0.001 Р2<0.001	51.5±0.6 Р2<0.001	21.3±0.7 Р1<0.001
печень	32.8±2.1	26.6±0.8 Р1<0.05	14.4±1.3 Р1<0.001 Р2<0.001	32.0±0.4 Р2<0.001	18.5±0.4 Р1<0.001
кровь	10.8±0.6	7.7±0.4 Р1<0.01	8.5±0.4 Р1<0.01	8.6±0.09 Р1<0.05	7.0±0.4 Р1<0.01

- значение достоверно относительно контроля- значение достоверно относительно предыдущего этапа гипотермии

Умеренная гипотермия 30-33°С вызывает снижение активности ферментов относительно контроля на 23%.

Глубокая гипотермия 18-20°С приводит к дальнейшему снижению активности кальпаинов в сердечной мышце крыс на 58.7%. Гипертермия 42°С вызывает также снижение относительно контроля на 59%.

Пролонгирование глубокой гипотермии в течении 2-х часов приводит к повышению активности кальпаина сердечной мышцы на 138%, относительно глубокой гипотермии.

В сердечной мышце выделена Са2+ - зависимая нейтральная протеаза, обладающая энкефалиназной активностью. В то же время известно, что энкефалины способны включаться в механизмы формирования и регуляции ответа организма на чрезвычайные воздействия (Лишманов и др., 1992), что, видимо, и происходит при 2х часовом пролонгировании глубокой гипотермии.

В мозгу активность кальпаинов составляет 23.28±0.6 мкмоль тирозина/мг белка.

Основные функции кальпаинов мозга, очевидно, связаны с ограниченным протеолизом определенных цитоплазматических и мембранных белков, включая белки рецепторы и протеинкиназу С, а также белков цитоскелета клетки, выполняющих важную роль в регуляции внутриклеточного метаболизма. Кальпаины мозга участвуют также в реализации таких функций нейронов, как аксональный транспорт, трансмембранная передача сигнала, долговременная память и др. (Seubert et al., 1988).