Протеолитическая активность нейтральных протеаз при

При пролонгировании глубокой гипотермии достоверных различий в изменении активности ферментов относительно контроля нет, а относительно гипотермии 18-20ºС активность нейтральных протеаз значительно повышается (на 75%).

В сыворотке крови к ферментам, активным в нейтральном диапазоне рН, относятся карбоксипептидаза В, плазмин, калликреин.

Калликреин-кининовая система крови является центральным звеном в комплексе гуморальных систем, регулирующих гомеостаз и осуществляющих адаптивно-защитные реакции организма, активно участвующие в снабжении органов и тканей кислородом при гипоксических состояниях. Ее активация является неспецифической реакцией организма и носит, в основном, защитный характер (Гельцер, Жилкова, 2005).

Плазмин обладает тромболитическим эффектом и снижает свертываемость крови. В организме он присутствует в виде неактивного предшественника - плазминогена, чья концентрация в плазме крови достигает 0.2 г/л (Кузнецова и др., 2004).

В наших исследованиях (рис. 12) в сыворотке крови общая активность нейтральных протеаз достоверно изменяется только при глубокой гипотермии по достижении и при ее пролонгировании. Глубокая гипотермия приводит к снижению активности ферментов относительно контроля на 35%, а длительное (2-х часовое) охлаждение вызывает повышение активности нейтральных протеаз на 42%.

В качестве дополнительного контроля нами была использована иммобилизация животных, которая, как оказалось, не влияет на общую активность нейтральных протеаз в сердечной мышце. При этом в мозгу и сыворотке крови отмечается незначительное снижение, а в печени оно достоверно.

Рис 12. Динамика изменения (в % по отношению к контролю) общей активности нейтральных протеаз сыворотки крови крыс при разных температурах тела.

Повышение общей активности нейтральных протеаз при пролонгировании глубокой гипотермии, возможно, связано с повышением концентрации ионов Са2+ в клетке. Поддержание физиологических концентраций Са2+ в цитозоле можно считать важнейшей функцией клетки (Иванов и др., 1999).

Содержание Са2+ в межклеточной жидкости в 10-20 тысяч раз больше, чем в цитозоле и составляет около 10-8 М. Однако, при этом ионы кальция играют ключевую роль в регуляции различных процессов внутриклеточного метаболизма. (Siesjo, Bengtsson, 1989). Поэтому Са2+ постоянно перемещается в клетку из межклеточной среды через определенные каналы в клеточной мембране.

Известно, что при гипотермии угнетаются процессы синтеза АТФ, наступает дефицит энергии и замедляется транспорт Са2+ из цитозоля в межклеточную среду. Незначительное (с 10-8 М в норме до 10-6 М) повышение Са2+ в цитозоле приводит к активации различных протеолитических и липолитических ферментов в клетке (Hochachka, Somero, 2002).

Таким образом, полученные нами результаты относительно повышения общей активности нейтральных протеаз при пролонгировании глубокой гипотермии, возможно, коррелируют с накоплением ионов Са2+ и, соответственно, с повышением активности Са2+ - зависимой нейтральной протеазы. В связи с вышеприведенными данными значительный интерес представляет исследование Са2+ - зависимой активности нейтральных протеаз ферментов кальпаиновой системы.