Отчет по летней производственной практике
Цели эксперимента:
Ø Определить линию самца(Cu, ct, vn(vu) (♂)) вида Drosophila melanogaster которого «выберет» самка wa (♀) для скрещивания.
Ø Записать и проанализировать результаты эксперимента.
Объект, на котором мы проводили исследования:
мухи дрозофилы вида Drosophila melanogaster. Выбор объекта обусловлен рядом преимуществ:
ü Высокая плодовитость (от 50 до 200 потомков)
ü Непродолжительный цикл развития (созревание яиц 10-12 суток, продолжительность жизни 3-4 недели)
ü Малом числом хромосом (гаплоидный набор хромосом равен 8 (2n=8))
ü Мухи дрозофилы хорошо изучены (известно большое число генов, которые определяют хорошо различимые признаки)
ü Удобство разведения(питание не требует особых затрат)
ü Чёткое разделение по полу(самцы мельче самок и др.)
Методика работы:
Приготовление питательной среды( по рецепту).
Объекты: вид Drosophila melanogaster линии Cu, ct, vn(vu) (♂) и wa (♀).
Особенности линий:
v Cu (♂) - крылья загнуты вверх
v Ct (♂) - крылья с вырезками
v vn(vu) (♂) - крылья без жилок
v wa (♀) - цвет глаз абрикосовый
У самки дрозофилы после спаривания жизнеспособная сперма сохраняется в половых путях в течение нескольких суток. Поэтому у оплодотворенной самки в любой данный момент в семяприемнике может находиться некоторое количество спермы от предыдущей копуляции. По этой причине для скрещивания необходимо брать девственных (виргинных) самок. С этой целью перед постановкой скрещивания в той линии, где необходимо получить девственных самок, всех мух необходимо вытряхнуть из пробирки. Так как самки и самцы дрозофилы в течение 6-8 ч после вылупления неспособны к оплодотворению, все мухи, отобранные за этот период, девственные.
В первые 2…3 ч после вылета у мух не расправлены крылья и тело удлиненное, светлое. У неоплодотворенной самки окраска покровов тела светло-серая. У недавно вылупившихся самцов тело светло-серое, а на кончике брюшка видна черная точка; лишь через несколько часов кончик брюшка у самцов становится полностью черным.
Для скрещивания 3…5 девственных самок соответствующей линии помещают в одну пробирку с таким же количеством самцов другой линии. Эти мухи составляют родительское поколение. При увеличении количества родителей появляется опасность перенаселения, в результате чего плодовитость мух падает. Она самка может отложить до 200 яиц, но в первые 1,5-2 суток после вылупления самки обычно не откладывают яиц или откладывают их очень мало. Максимальное количество яиц откладывают 3…4-суточные самки. Кладка яиц лучше всего происходит на питательную среду с хорошо проросшими дрожжами, т. е. спустя 1…2 суток после ее приготовления. Употребление среды спустя 3…4 суток после варки не рекомендуется.
Для откладки яиц мухи должны находиться в пробирке 3…5 суток, после чего их выбрасывают, а из отложенных яиц развивается следующее поколение мух. Подсчет мух целесообразнее производить на 2…3 сутки после начала вылета. В более ранние сроки вылетают преимущественно самки, а в более поздние наблюдается гибель мух.
Ход работы:
Взяли 20 пробирок, в каждую из которых посадили самку линии wa (♀) и по 3 штуки самца каждой линии Cu(♂), ct(♂), vn(vu) (♂). После скрещивания все гибриды первого поколения оказались дикого типа. Для получения второго поколения мы удалили родительские особи(для более высокой точности результатов) и пересадили первое поколение F1 в новую среду. По истечению 10 суток мы получили и проанализировали второе поколение F2.
§ Родительское поколение:
|
№ проб. |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
17 |
18 |
19 |
20 |
|
Линии |
Cu, ct, vn(vu) (♂) и wa (♀) |
TimeBiology